蛋白质功能依赖于特定的三维结构，而结构的形成则始于氨基酸链的线性排列。在这条链状分子中，两个末端——氨基末端（N端）和羧基末端（C端）——不仅是蛋白质合成的起点与终点，更是调控蛋白质命运的关键功能位点。理解N端和C端的特性，对揭示蛋白质工作机制及疾病机制具有重要意义。

一、N端和C端的化学本质

蛋白质由氨基酸通过肽键线性连接而成。每个氨基酸含有一个氨基（-NH₂）和一个羧基（-COOH）。在肽链合成过程中，氨基作为起点参与缩合反应，形成肽键后保留游离氨基的一端称为N端；羧基作为终点保留游离羧基的一端则为C端。这种方向性（N→C）由核糖体翻译过程严格决定，并贯穿于蛋白质的整个生命周期：

• N端（氨基端）：链的起始端，含有一个游离的氨基基团；
• C端（羧基端）：链的终止端，含有一个游离的羧酸基团。

这种方向性不仅是蛋白质一级结构的标志，还直接影响其高级结构的形成。例如，α螺旋和β折叠的走向、结构域的组装均与N端和C端的空间排布密切相关。

二、生物学功能的分工与协同

1、N端的核心角色

（1）蛋白质合成的起点

N端是翻译起始的锚定点，其序列特征（如起始密码子）直接影响翻译效率与准确性。

（2）定位信号的核心载体

许多蛋白质的N端携带信号肽序列，指导其靶向至内质网、线粒体等特定细胞器。例如，分泌蛋白通过N端信号肽进入分泌途径。

（3）翻译后修饰的调控位点

N端乙酰化是最常见的共价修饰之一，可影响蛋白质稳定性、亚细胞定位及相互作用网络。

2、C端的功能多样性

（1）结构稳定性的贡献者

C端常参与疏水核心的形成或与相邻结构域相互作用，维持蛋白质整体构象。

（2）功能模块的集成平台

部分蛋白质的C端携带酶活性中心、结合位点或调控结构域，例如G蛋白偶联受体（GPCR）的C端参与信号转导。

（3）降解信号的储存库

某些C端序列（如降解标签）可被泛素-蛋白酶体系统识别，调控蛋白质的周转速率。

3、N端和C端的测序方法

（1）N端测序

N端测序的经典方法是Edman降解，它利用异硫氰酸苯酯（PITC）与N-端氨基酸反应，形成PTH-氨基酸衍生物，然后逐步去除N端残基并检测其种类。这种方法具有较高的精确度，能够提供单氨基酸分辨率的序列信息。然而，Edman降解受限于N端修饰，如乙酰化或甲酰化的蛋白无法直接测定。此外，该方法适用于短肽和高纯度蛋白，但在复杂蛋白质组学研究中应用受限。因此，现代N-端测序主要依赖质谱分析，尤其是LC-MS/MS（液相色谱-串联质谱）技术。通过使用特定的蛋白酶（如Lys-N）定向裂解N-端附近的肽键，结合高分辨率质谱，可以同时解析N端序列及其翻译后修饰。Top-down MS（全蛋白质谱）方法也用于N端测序，它无需酶解蛋白，可直接检测完整蛋白，并通过碎裂模式解析N-端结构。这些方法克服了Edman降解的局限性，提高了N-端测序的通量和灵敏度。

（2）C端测序

相较于N端，C端测序更加具有挑战性。由于缺乏像Edman降解这样的高效化学降解策略，C端测序主要依赖羧肽酶降解法和质谱技术。羧肽酶降解法利用特定羧肽酶（如Carboxypeptidase A/B/Y）从C端逐步水解氨基酸，并通过色谱或质谱分析释放的氨基酸残基，从而推测C端序列。然而，该方法受限于羧肽酶的特异性，并且无法处理C端修饰（如酰胺化、糖基化）蛋白。此外，逐步降解的过程较慢，测序效率低，因此其在高通量蛋白质组学研究中的应用较少。现代C端测序更倾向于利用LC-MS/MS，通过特定C端蛋白酶（如Asp-N、Glu-C）消化蛋白，并结合质谱检测C-端肽段。Top-down MS在C端测序中的应用也日益增多，它能够直接检测完整蛋白的C端序列，并解析C端修饰信息。此外，Middle-down MS策略通过部分酶解保留较长的C端片段，从而提高C端序列的覆盖率，克服了Bottom-up MS策略中C端片段可能丢失的问题。

N端和C端作为蛋白质的“分子身份证”，不仅定义了其化学本质，更通过动态修饰与相互作用参与生命活动的精密调控。随着蛋白质组学技术的进步，对末端功能的研究将持续推动疾病诊断、药物开发及合成生物学等领域的突破。凭借专业的技术团队和7大质量控制检测平台，百泰派克生物科技为从事蛋白质组学研究的科研人员提供高质量的蛋白质N/C端测序服务，获得广泛认可。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

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