完整蛋白质定量（intact protein quantification）是一种用于分析完整蛋白质分子中其含量的技术。通过不对蛋白质进行预处理如降解或剪切，直接对其进行量化分析，这一方法在蛋白质组学研究中尤为重要。完整蛋白质定量能够保持蛋白质的天然状态，不丢失其翻译后修饰等重要信息，为疾病标志物筛选、药物开发及生物学机制研究提供了独特的视角。

一、原理

完整蛋白质定量主要基于质谱技术。质谱仪通过测量蛋白质分子的质荷比（m/z），能够直接探测并量化蛋白质。此过程包括电离、碎裂和检测三个基本步骤。电喷雾电离（ESI）和基质辅助激光解吸电离（MALDI）是两种常用的电离技术，适用于不同性质的蛋白质样本。质谱分析能够在不破坏蛋白质分子结构的情况下，提供对其质量和数量的精确测量。

二、技术步骤

1、样品准备

样品的制备是完整蛋白质定量中的关键步骤。样品需要保持蛋白质的天然状态，而避免降解或变性。通常，样品会被溶于适当的缓冲液中，并通过离心去除不溶性杂质。

2、电离

根据样品特性选择合适的电离技术。ESI适用于溶液中的蛋白质，能够产生多电荷离子，有助于高分辨率的定量分析；MALDI则适合于固体样本，通过基质吸收激光能量实现样品的电离。

3、质谱分析

质谱仪测量电离后蛋白质的m/z。高分辨率质谱可以提供更为精细的分子量信息，使得不同蛋白质分子之间的差异得以区分。质谱分析的结果往往需要结合生物信息学工具进行进一步的数据解析。

4、数据解析

数据解析是完整蛋白质定量的最后一步。通过对质谱数据的分析，计算样品中不同蛋白质的丰度。通常，这需要借助于标准品或内标以校准质谱信号。

三、应用

这项技术在多种生物学和医学研究中具有重要应用。例如，在生物标志物的发现中，通过定量不同样本中蛋白质的丰度差异，可以辨识出与疾病状态相关的特异性蛋白质。药物研发过程中，它可以用于评估药物对蛋白质功能及其相互作用网络的影响。此外，在合成生物学中，该技术帮助研究人员更好地理解和优化基因表达系统。

完整蛋白质定量方法的选择和优化需要考虑样品类型、实验目的以及可用资源。质谱技术的不断进步，尤其是分辨率和灵敏度的提升，使得其成为一种高效、精准的分析手段。通过结合其他生物分析技术，如蛋白质组学和代谢组学，研究人员能够更全面地揭示生物系统的复杂性。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

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